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最近有不少小伙伴咨詢(xún),你們這個(gè)SmartCell 600、800和900有什么區別?還有更直接的,那臺紫色怪好看的,跟阿藍和小綠有什么區別?看似外觀(guān)形狀相同,儀器顏色和軟件界面卻有很大差別,當然啦,他們檢測的細胞類(lèi)型又有差異,在各自應用領(lǐng)域發(fā)光發(fā)熱!
那么如何根據自己的需求來(lái)選一款稱(chēng)心如意的細胞計數儀呢?
1、測試細胞類(lèi)型
在選擇儀器之前,我們首先要思考兩個(gè)問(wèn)題:
1、自己的細胞房培養哪些細胞?
一般實(shí)驗室細胞房培養的大多為常規傳代培養的細胞系,比如腫瘤細胞、動(dòng)物哺乳細胞、昆蟲(chóng)細胞等,這類(lèi)細胞直徑范圍在5-40μm。 還有一些可能是從組織或血液分離的原代細胞,比如脾細胞、PBMC細胞、臍帶血或骨髓源的原代間充質(zhì)干細胞等;這類(lèi)細胞組分復雜,可能有組織碎片、血小板、紅細胞等雜質(zhì)干擾 。 最后呢,還有一些老師在某些細分領(lǐng)域計數需求,比如酵母細胞、球藻細胞、芽孢桿菌等微生物小粒徑細胞(1-10μm),甚至低于1μm 的大腸桿菌 。 CHO細胞 (10-20μm) T細胞 (6-10μm) 酵母細胞 (2-6μm)
我們根據培養細胞類(lèi)型的直徑大小,第一步要確認合適的物鏡放大倍數,就跟在顯微鏡下有4X、10X、40X和100X不同放大倍數一樣,需要選擇一個(gè)正確的物鏡來(lái)滿(mǎn)足成像清晰和識別。正常的細胞系和原代細胞計數儀采用5X物鏡光學(xué)放大就可滿(mǎn)足,針對酵母和球藻以及一些粒徑更小的微生物樣本,需要用到10X甚至20X物鏡才能夠看的清晰。
5倍放大 酵母細胞 10倍放大 酵母細胞 2、細胞分析是關(guān)注細胞活率還只是細胞濃度?
細胞計數儀分為明場(chǎng)款(激發(fā)光為白光)和熒光款(不同顏色的激發(fā)光),其中明場(chǎng)包括非臺盼藍染色和臺盼藍染色,如果您平時(shí)只關(guān)注細胞濃度,這時(shí)選一款明場(chǎng)計數儀即可滿(mǎn)足需求。那如果細胞濃度和細胞活率都關(guān)注,我們就需要考慮用經(jīng)典臺盼藍染色還是AO(吖啶橙)/PI(碘化丙啶)雙熒光染色分析。
臺盼藍和熒光染色比較 臺盼藍染色 AO/PI熒光染色 原理 細胞膜的通透性 (非特異性染色) 核酸染色 (特異性染色) 識別區分 活細胞:不染色 死細胞:藍色 活細胞:綠熒光 死細胞:紅熒光 適用范圍 常規傳代培養細胞 細胞系、原代細胞、免疫細胞等 臺盼藍染色 AO/PI雙熒光染色
當然,除了臺盼藍和AO/PI雙熒光染色之外,還可以通過(guò)AO/DAPI染色,DAPI染色可以標記所有細胞核,可能在特定條件下染色死細胞。PI相比DAPI染死細胞則更為專(zhuān)一,用于標記失去膜完整性的死細胞。針對細菌的活率分析,還可以通過(guò)SYTO-9/PI染色,SYTO-9是一種能夠透過(guò)細胞膜的綠色熒光核酸染料,可用于細菌的RNA和DNA染色。
2、測試數據的可靠性 在完成第一步選擇后,接下來(lái)需要選擇一個(gè)檢測數據可靠的計數儀,無(wú)論它功能多么強大,數據可靠性是關(guān)鍵的,它主要體現在測試數據的準確性和穩定性。 其中準確性是測試值與真實(shí)值之間的差異,我們一方面可以通過(guò)與人工血球計數對比,相同的一管細胞樣本,通常要求計數儀與人工之間的計數誤差在10%以?xún)?;另一方面可以用標準品(不同濃度、直徑和活率的標準品)進(jìn)行驗證;要求更高的用戶(hù)會(huì )請第三方計量公司進(jìn)行再次計量驗證,最后結合自己的細胞進(jìn)行方法學(xué)驗證,通過(guò)以上多重驗證,最后確定儀器的準確性 。 其次,穩定性通常我們可以對同一個(gè)樣品進(jìn)行幾組平行測試,或者對同一個(gè)高濃度樣品做梯度稀釋分析線(xiàn)性關(guān)系,這里面有一個(gè)重要的參數CV值(變異系數),一個(gè)可靠的計數儀,在合適的濃度范圍內,通常CV值<5%。
決定一個(gè)計數儀數據可靠性,主要有以下兩個(gè)方面: 硬件 包括光路系統、成像系統,其中成像的像素決定圖片的清晰度,從而影響到識別結果;配置越高,成像越清晰;其次是自動(dòng)化過(guò)程,這里面包括進(jìn)樣、對焦、曝光等參數,全自動(dòng)過(guò)程能減少人為操作帶來(lái)的誤差,從而提高檢測數據的穩定性, 低像素,成像模糊 高像素,成像清晰
軟件算法 在獲得一張高質(zhì)量圖片之后,要對其進(jìn)行算法識別分析,目前主要基于兩種算法,一種是基于灰度值(普通算法),另外一種是基于深度學(xué)習人工智能算法(AI算法),這種先進(jìn)算法相對于普通算法,能夠對聚團細胞精準分割,對不規則細胞精準識別,對含有細胞碎片、雜質(zhì)等復雜樣本精確計數,這種算法能夠實(shí)現不同領(lǐng)域、不用應用場(chǎng)景的計數分析。萌薇生物也是國內早期將AI技術(shù)應用在細胞計數領(lǐng)域并進(jìn)行儀器開(kāi)發(fā)的廠(chǎng)家。
3、檢測效率
傳統的血球計數法能夠不斷被智能細胞計數儀替代,其中檢測效率是一個(gè)非常大的因素,如果您每天檢測的細胞樣本量多,檢測效率相當關(guān)鍵,一個(gè)優(yōu)秀的計數儀,不僅準和穩,快也很重要。檢測效率主要包括以下兩點(diǎn):
單個(gè)樣品檢測時(shí)間:通常檢測一個(gè)樣品,人工計數時(shí)間在3-5分鐘,計數儀在10秒到2分鐘時(shí)間不等,產(chǎn)生差異的原因主要是儀器的自動(dòng)化程度,尤其是手動(dòng)進(jìn)樣和手動(dòng)調焦會(huì )直接影響到計數的效率,其次是算法分析的時(shí)間也有差異,例如先進(jìn)的AI算法將直接縮短處理圖片的時(shí)間,這也是為什么萌薇計數儀實(shí)現測試分析速度快的重要原因。
計數板通量:一塊血球計數板有兩個(gè)加樣孔槽,市面上絕大數計數儀也是采用兩個(gè)通量,當我們樣本量比較多時(shí),就需要更高通量的計數板,一次性可以同時(shí)測多少樣品,這也是決定效率的一個(gè)因素。萌薇計數板采用6樣品孔設計,不僅在提高效率的同時(shí),還一定程度降低了測試成本。
4、其他因素 除了以上三點(diǎn)以外,還有一些其他因素也得考慮: 機型--分體機還是一體機,主要根據細胞房空間大小來(lái)選擇,分體機需要連接電腦,一體機則包含顯示屏,可直接操作,相對分體機價(jià)格要高一些,但使用起來(lái)簡(jiǎn)單方便。
軟件分析功能--一臺優(yōu)秀的計數儀在完成基本的參數(細胞濃度、活率、直徑、圓度、聚團率)分析功能之后,還要具備對測試數據的整理和分析,包括直徑分布圖、測試數據再分析、數據對比分析(CV值計算)、增殖曲線(xiàn)等分析功能;滿(mǎn)足JPG、EXCEL、PDF等多種格式的數據輸出方式,不僅能通過(guò)U盤(pán)輸出還可以通過(guò)服務(wù)器輸出;數據的備份和恢復也是必要的,保障用戶(hù)的數據萬(wàn)無(wú)一失;除此之外,稀釋計算器和傳代計算器會(huì )讓您的實(shí)驗變得更加簡(jiǎn)單。
性?xún)r(jià)比--硬件配置高,軟件分析功能強大,技術(shù)參數優(yōu)秀的計數儀往往相比于低配置的參數價(jià)格高一些,但不能一味追求低價(jià),讓數據準確性和精確性沒(méi)了保障,甚至反而影響我們的實(shí)驗進(jìn)度,最后可能面臨重新選擇。所有小薇經(jīng)常在一些用戶(hù)細胞房會(huì )發(fā)現在吃灰的低端計數儀,面對這些價(jià)格低的儀器選擇要慎重!
服務(wù)--這里包括售前售后服務(wù)、試用培訓、技術(shù)支持,3Q驗證服務(wù),以及儀器的質(zhì)保期。萌薇計數儀三年質(zhì)保,買(mǎi)的放心,用的安心,并在全國主要中心城市有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)支持,隨時(shí)響應。
聽(tīng)了以上的分析,我想大家對選擇一款合適的計數儀有一定的心得,不管你是想選擇一體機還是分體機,明場(chǎng)還是熒光,樣品是常規培養的細胞還是粒徑小的微生物樣本,又或者想選一個(gè)高性?xún)r(jià)比且服務(wù)有保障的機器,那么這邊有幾款產(chǎn)品想介紹給大家,總有一款能滿(mǎn)足您的需求。
計數儀產(chǎn)品介紹 SmartCell 200 Plus 明場(chǎng)分體機(連電腦) 非臺盼藍細胞計數 臺盼藍染色活率分析 人工智能算法 630萬(wàn)像素高清成像 6樣品孔通量 8秒檢測分析 明場(chǎng)一體機 非臺盼藍細胞計數 臺盼藍染色活率分析 人工智能算法 630萬(wàn)像素高清成像 6樣品孔通量 8秒檢測分析 SmartCell 600 SmartCell 800 明場(chǎng)+雙熒光一體機 AO/PI熒光分析 非臺盼藍細胞計數 臺盼藍活率分析 GFP/RFP轉染分析 人工智能算法 630萬(wàn)像素高清成像 6樣品孔通量 SmartCell 880 明場(chǎng)+四熒光一體機 AO/PI/DAPI/CY5熒光分析 非臺盼藍細胞計數 臺盼藍活率分析 GFP/RFP轉染分析 人工智能算法 630萬(wàn)像素高清成像 6樣品孔通量 明場(chǎng)一體機 酵母、小球藻、菌種計數 寄生蟲(chóng)卵囊計數 血小板、免疫細胞計數 臺盼藍染色活率分析 人工智能算法 630萬(wàn)像素高清成像 6樣品孔通量 20倍光學(xué)放大 SmartCell 900 BF SmartCell 900 FL 明場(chǎng)+雙熒光一體機 酵母、小球藻、菌種計數 血小板、免疫細胞計數 雙熒光活率分析 人工智能算法 630萬(wàn)像素高清成像 6樣品孔通量 20倍光學(xué)放大 明場(chǎng)+雙熒光一體機 AO/PI熒光分析 臺盼藍染色分析 非臺盼藍細胞計數 GFP/RFP轉染分析 人工智能算法 1200萬(wàn)像素高清成像 6樣品孔通量 Find C
當大家想擁有一臺合適的計數儀時(shí),首先從自身測試的細胞樣本出發(fā),選擇相對應原理的儀器,再參考其核心技術(shù)參數,尤其是成像系統和算法,同時(shí)還要考慮儀器檢測數據的可靠性和檢測效率,當然,服務(wù)質(zhì)量和質(zhì)保也不能忽視。
萌薇細胞計數儀不僅能夠滿(mǎn)足多領(lǐng)域、多應用場(chǎng)景的計數分析,可以對細胞濃度、活率等細胞參數進(jìn)行準確檢測;為客戶(hù)提供符合FDA21 CFR Part 11要求的安全用戶(hù)登錄系統、多級用戶(hù)管理權限及審計追蹤,還可以為客戶(hù)提供3Q驗證服務(wù)和方法學(xué)驗證,同時(shí)軟件可通過(guò)CSV認證(計算機化系統認證),支持數據的備份與恢復;儀器具備CE認證(安全合格標志)和VHP(汽化過(guò)氧化氫)滅菌。這些都將為您的細胞檢測方法建立放心、可靠的計數標準。